Un equip de recerca liderat per l’IBEC i l’ICFO ha desenvolupat i validat una nova tècnica d’espectroscòpia d’electrons fotoelectroquímica per investigar la dinàmica de separació de càrregues, un pas crucial de la fotosíntesi, en complexos fotosintètics.
La fotosíntesi és el procés mitjançant el qual alguns organismes (per exemple, plantes, algues i algunes bactèries) transformen l’energia lluminosa en energia química. Aquest procés comença amb l’absorció de llum (fotons) per part de certs pigments (principalment clorofil·la) i acaba amb un flux d’electrons en el qual se sustenten les reaccions bioquímiques que fan possible la vida en la terra.
Un pas intermedi que encara no s’ha explorat directament, principalment perquè es produeix en escales de temps ultraràpides, és l’anomenada separació de càrregues. Un cop el pigment absorbeix un fotó, un electró s’excita a un nivell d’energia superior. Aquesta energia addicional es transfereix a ubicacions específiques, anomenades centres de reacció, provocant que, de nou, un electró de la clorofil·la en aquests centres s’exciti i es transfereixi a un altre complex (la molècula acceptora). En conseqüència, la clorofil·la es carrega positivament, cosa que significa que ha tingut lloc la separació de càrregues. Aquesta diferència de càrrega és crucial perquè estableix un flux d’electrons d’alta energia que impulsarà la resta del procés fotosintètic.
Crec que els nostres resultats són molt significatius perquè hem proporcionat una nova forma d’accedir directament als processos de separació de càrregues, que són crucials per entendre la fotosíntesi.
Luca Bolzonello
Per a poder desxifrar els complexos fotosintètics i idear noves estratègies fotosintètiques, és clau investigar les rutes que condueixen a la separació de càrregues. Aquest fenomen ha estat abordat recentment en un treball conjunt entre investigadors de l’ICFO i de l’IBEC, també en col·laboració amb la Universitat de Pàdua i la Universitat Lliure d’Amsterdam. L’equip ha desenvolupat i validat una nova tècnica d’Espectroscòpia Electrònica Bidimensional Fotoelectroquímica (PEC2DES, per les seves sigles en anglès), que permet investigar directament la dinàmica de la separació de càrregues en complexos fotosintètics. El seu mètode va ser presentat a ACS Applied Materials and Interfaces.
Segons els investigadors, el descobriment podria utilitzar-se en dispositius biohíbrids i sensors que depenen del control precís i la comprensió dels processos de transferència d’electrons dins d’assemblatges de proteïnes complexos. El Dr. Luca Bolzonello Bolzonello, investigador de l’IBEC y coprimer autor de l’article, també suggereix que una de les aplicacions prometedores de PEC2DES podria ser “el disseny i l’optimització de sistemes fotosintètics artificials, cosa que al seu torn podria millorar l’eficiència de la conversió d’energia solar”.
“Crec que els nostres resultats són molt significatius perquè hem proporcionat una nova forma d’accedir directament als processos de separació de càrregues, que són crucials per entendre la fotosíntesi”, destaca Bolzonello.
A diferència dels mètodes òptics tradicionals, PEC2DES combina de manera única la detecció fotoelectroquímica (PEC) amb l’espectroscòpia no lineal (2DES), permetent investigar l’esdeveniment de la separació de càrregues de manera selectiva i revelant pistes importants sobre les dinàmiques d’excitació i transferència de càrregues dins de sistemes fotosintètics complexos. Encara més important, aquesta tècnica pot estudiar la dinàmica ultraràpida dels excitons dins del sistema senzillament mesurant directament el producte de la fotosíntesi, és a dir, les càrregues elèctriques que es mouen al llarg de la cadena de transport d’electrons.
Combinant PEC i 2DES per obtenir PEC2DES
Per validar el seu mètode, els investigadors van utilitzar el Complex Fotosistema I-Complex de Captació de Llum I (PSI-LHCI, per les seves sigles en anglès) com a sistema model, on l’absorció de llum per les ‘clorofil·les d’antena’ s’utilitza per a impulsar la separació de càrregues al centre de reacció. “A l’IBEC fa anys que estudiem com les proteïnes intercanvien electrons, un procés fonamental per al metabolisme de les cèl·lules. Aquest coneixement ens va ajudar a desenvolupar un mètode per a captar els electrons que produeix el Complex Fotosistema-I en ser il·luminat.” Apunta Manuel López, coprimer autor de l’estudi que va defensar recentment la seva tesi doctoral a l’IBEC.
A l’IBEC fa anys que estudiem com les proteïnes intercanvien electrons, un procés fonamental per al metabolisme de les cèl·lules. Aquest coneixement ens va ajudar a desenvolupar un mètode per a captar els electrons que produeix el Complex Fotosistema-I en ser il·luminat.
Manuel López
Primer, van desenvolupar el sistema fotoelectroquímic (PEC) a l’IBEC per mesurar el corrent generat pels complexos PSI-LHCI. Després, van integrar aquest sistema amb un sistema d’espectroscòpia electrònica bidimensional (2DES) a l’ICFO. Tal com detalla López: “El desafiament d’aquest projecte no sols consisteix a quantificar el corrent elèctric generat pel Fotosistema I, sinó a fer-ho amb la precisió necessària per a revelar els subtils processos de migració d’excitacions entre les clorofil·les. Amb les mesures de corrent, busquem obtenir informació sobre com les clorofil·les excitades transfereixen la seva energia al centre de reacció on l’energia d’excitació es transforma en parells de càrrega elèctrica.” Aquesta combinació sense precedents de PEC i 2DES va donar lloc a la tècnica PEC2DES presentada al seu estudi, que per primera vegada va identificar les càrregues generades per la interacció de dos fotons als pigments d’una proteïna fotosintètica.
“Els principals obstacles que vam trobar van ser la necessitat de mantenir l’estabilitat de la mostra durant llargs períodes de temps, cosa que les mesures amb 2DES sempre requereixen, i la dificultat d’interpretar el senyal PEC2DES”, recorda Bolzonello. “Tot i que vam descobrir que la tècnica és cega davant d’algunes característiques ultraràpides, hem aplanat el camí per resoldre aquests problemes”.
Perspectives futures: cap a sistemes fotosintètics artificials
L’equip acaba d’obrir la porta per rastrejar la dinàmica ultraràpida dels processos de separació de càrregues amb la tècnica PEC2DES. En un futur proper, els agradaria perfeccionar la seva eina identificant i minimitzant els efectes de la barreja incoherent, un fenomen no desitjat que contamina l’objecte d’estudi, en aquest cas, la dinàmica de separació de càrregues. També consideren explorar l’aplicació d’aquesta tècnica a altres complexos fotosintètics o dirigir-la a sistemes artificials on l’efecte de la barreja incoherent, la principal limitació d’aquesta nova tècnica, es minimitzi.
Aquesta recerca ha estat liderada pels professors de recerca ICREA Pau Gorostiza, investigador principal en l’IBEC, i Niek F. van Hulst, investigador principal en ICFO. A més, forma part del projecte Q-SPET finançat pel programa BIST Ignite, que busca fomentar la col·laboració entre investigadors i investigadores de la comunitat BIST.
Article referenciat:
Manuel López-Ortiz, Luca Bolzonello, Matteo Bruschi, Elisa Fresch, Elisabetta Collini, Chen Hu, Roberta Croce, Niek F. van Hulst, y Pau Gorostiza. Photoelectrochemical Two-Dimensional Electronic Spectroscopy (PEC2DES) of Photosystem I: Charge Separation Dynamics Hidden in a Multichromophoric Landscape. ACS Applied Materials & Interfaces (2024). DOI: 10.1021/acsami.4c03652
